最新刊期
      2000 年 第 3 期

        研究论文

      • 张连文,林维真,韩镇辉,姚思德,林念芸
        2000, 18(3): 161-167.
        摘要：采用琼脂糖凝胶电泳研究了以可见光引发的三联吡啶钌（III）与DNA之间的光敏反应。发现在有氧气条件下，三联吡啶钌（III）经427～457nm光照可导致DNA的光敏损伤，其途径主要是通过单线态氧与DNA反应引起的碱基损伤，另外则是通过DNA与三联吡啶钌阳离子自由基（[Ru2+（bpy）2（bpy+•）]3+）反应导致碱基损伤而产生的，而且损伤与DNA和联吡啶钌之间的浓度比存在着一定关系。对照单链DNA及双链DNA光敏损伤结果后发现，单链DNA较双链DNA更易于产生光敏损伤，这可能是由于单链DNA中碱基较双链DNA中的更为暴露的缘故。  
        关键词：三联吡啶钌（III）;光敏损伤;凝胶电泳;ssDNA;dsDNA   
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        发布时间：2023-04-07
      • 俎建华,王衡东,叶寅,姚思德,邱士龙
        2000, 18(3): 168-174.
        摘要：采用γ射线引发共辐照接枝方法，研究了丙烯酸（AA）及对苯乙烯磺酸钠（SSS）双元混合体系对聚乙烯（PE）薄膜的接枝规律性，用一步法直接制备了聚乙烯强酸型阳离子交换膜。研究结果表明，在辐照接枝过程中，AA首先与聚乙烯反应，改善了薄膜表面的亲水性，然后SSS与PE接枝共聚。通过SSS单一体系及双元混合体系的研究，发现AA的存在是实现PE磺化的必要条件。本文系统研究了影响共接枝反应的辐照剂量、阻聚剂用量、单体摩尔比及总摩尔浓度变化等因素。并做了接枝物的IR分析及物理电化学性能测试。  
        关键词：聚乙烯;丙烯酸;对苯乙烯磺酸钠;共辐照接枝;强酸型阳离子交换膜   
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      • 刘树铮,白欧,陈东,叶飞
        2000, 18(3): 175-186.
        摘要：本文报道全身X射线照射后小鼠胸腺和/或脾脏中与细胞存活及细胞周期调控相关基因转录和表达水平, 与免疫反应相关基因的转录水平以及信号分子表达的变化. 结果显示, 高、低剂量照射引起所检测的大多数参数的相反效应. 分析了这些变化在不同剂量电离辐射所致细胞反应发生中的意义.  
        关键词：辐射;基因;细胞存活;细胞因子;细胞周期调控;信号传递   
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      • 谷庆阳,高亚兵,李永兰,杨志祥,周洁,王德文,崔玉芳,赵坡
        2000, 18(3): 187-192.
        摘要：研究大鼠放射性皮肤溃疡组织中p53, MDM2表达. 采用140只Wistar大鼠进行局部照射制备放射性皮肤溃疡动物模型, 观察病变一年, 然后采用p53(Goat), MDM2(兔)多克隆抗体和SP免疫组化方法检测皮肤溃疡组织中p53, MDM2的表达情况. 结果表明, p53, MDM2的高表达阳性率分别为9.7%(7/72)、19.4%(14/72), 两者阳性部位主要见于增生肥大的鳞状上皮细胞核、间质成纤维细胞及血管内皮细胞核. p53, MDM2基因的变化及蛋白的高表达可能与放射性皮肤溃疡癌变及不愈合有关.  
        关键词：大鼠;放射性皮肤溃疡;P53;MDM2   
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      • 王明锁,杜泽吉,孔向蓉,苏燎原
        2000, 18(3): 193-197.
        摘要：研究了旨在克隆抗辐射菌Deinococcus radiodurans的lexA基因并构建其表达载体，以便进一步研究lexA基因的功能及其在辐射抗性中的作用。主要的实验步骤包括分离提取抗辐射菌基因组DNA，分离出lexA基因并测定其序列，克隆于质粒载体PUC19, 用电击穿孔法将重组的质粒导入大肠杆菌JM109, SDS-PAGE检测基因的表达。用定点突变技术，改变lexA基因核糖体结合位点（RBS）, 以增强lexA基因的表达。结果表明，lexA基因位于基因组DNA的BlnI-AscI片断中，由630个碱基对（bp）组成，编码210个氨基酸（aa）, 理论上推定，分子量为22.5kD，等电点为6.4。用pUC19构建的lexA基因表达载体能在大肠杆菌JM109中表达，但表达效率低，改变lexA的核糖体结合位点RBS可提高该基因表达水平，使进一步分离纯化lexA蛋白质以及深入研究该基因的作用成为可能。  
        关键词：抗辐射菌;lexA基因;基因克隆;基因表达   
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      • 周光明,卫增泉,李文建,王菊芳,何静,李强,党秉荣,颉红梅,高清祥
        2000, 18(3): 198-202.
        摘要：用倒转脉冲场凝胶电泳（PIGE）研究了3.17MeV/u 16O6+诱导的肝癌细胞DNA双链断裂（DSB）及其修复效应。结果表明：DSB的诱导与辐照剂量呈正相关，其产额为0.43DSBs/100Mbp:Gy，与60Co γ射线相比相对生物学效应为1.69。DSB片段重接一半所需要的时间（t1/2）与剂量有关，剂量越大，t1/2越长。重接的方式主要表现为小片段连接为较大的片段。  
        关键词：16O6+;DNA双链断裂;脉冲场凝胶电泳;人肝癌细胞   
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      • 崔大祥,曾桂英,王枫,田芙蓉,闫小君,任东青,赵涛,苏成芝
        2000, 18(3): 203-207.
        摘要：为从基因水平探讨小肠核糖核酸，促进小鼠电离辐射肠道损伤修复的机理，采用随机分组法把90只小鼠分成4组，建立辐射后给予40µg RNA治疗的实验组与0.4mL生理盐水治疗的对照组模型，分别于照射后6、12、24h, 4d和8d采集小肠空肠段标本，运用消减杂交基础上的LD-PCR技术，分离实验组与对照组之间的差异表达基因。结果表明；实验组与对照组6、12、24h, 4d和8d的消减后LD-PCR产物克隆成功，共获取165个新克隆，其中实验组6、12、24h, 4d和8d的克隆新表达基因数分别为18、22、25、13和12个，编号依次为XCZ1-90，即为90个与注入RNA修复密切相关的高表达基因；对照组6、12、24h, 4d和8d的克隆新表达基因数分别为22、25、14、6和8个，编号为AXCZ1-75，即为75个可能与电离辐射损伤相关的高表达基因。本工作成功地建立了辐射后给予RNA治疗的实验组与生理盐水治疗的对照组模型；从实验组与对照组之间分离并克隆了165个新基因，其中90个与注入RNA修复密切相关的高表达基因，75个可能与电离辐射损伤相关的高表达基因。  
        关键词：小鼠;辐射;损伤;修复;表达基因;消减杂交;长距离-PCR   
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      • 傅海青,罗灿,傅士波,鞠桂芝
        2000, 18(3): 208-211.
        摘要：采用流式细胞术和Northern blot杂交检测了X射线照射后EL-4细胞中p53蛋白及其下游基因MDM2 mRNA和蛋白表达的变化，以探讨X射线照射诱导EL-4细胞G1期阻滞的分子机制。结果表明：经4Gy X射线照射后的EL-4细胞，p53蛋白表达在照射后2h增高，4h达峰值，持续至照射后24h（p <0.05～0.001）；MDM2蛋白的表达在照射后4～24h明显升高（p <0.05～0.01）。进一步观察X射线照射后MDM2 mRNA水平的时程变化后发现，在经4Gy X射线照射后的EL-4细胞中，MDM2 mRNA水平在照射后l～8h有增高趋势，其中，2h明显升高（p <0.01）。结果表明，X射线照射EL-4细胞可通过p53蛋白诱导MDM2蛋白表达，从而限制G1期阻滞的时间，使DNA损伤修复后的细胞重新进入细胞周期。  
        关键词：电离辐射;EL-4细胞;MDM2;P53   
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      • 从玉文,陈家佩,赵卫红,吴岚军
        2000, 18(3): 212-217.
        摘要：为了解造血因子受体信号转导在造血细胞辐射损伤时的变化及其与细胞增殖的关系，应用MTT法分别观察了蛋白质酪氨酸和丝苏氨酸激酶及其磷酸酶抑制剂对照射及未照射NFS-60细胞增殖的影响。结果显示，一定浓度的磷酸酶抑制剂可促进细胞增殖，而激酶抑制剂则抑制细胞生长，同未照射细胞相比，磷酸酶抑制剂对3Gy照射细胞具有更强的促增殖作用，而某些激酶抑制剂则可加重细胞的辐射损伤。提示辐射后NFS-60细胞激酶／磷酸酶自稳平衡失调，推测这可能是辐射后造血细胞增殖抑制的原因之一。  
        关键词：信号分子抑制剂;辐射损伤;NFS-60细胞   
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      • 刘静,纪树荃,秦凤华,陈惠仁,柳小兰,耿玉
        2000, 18(3): 218-222.
        摘要：为观察小鼠骨髓细胞（BMC）及骨髓基质细胞（BMSC）混合输注对受致死剂量照射小鼠造血重建的影响，给予受致死剂量照射的Balb/c小鼠输注同基因BMC 1×107个及经体外扩增的同基因原代BMSC 2×105个，并与单纯骨髓移植组进行了比较。结果表明，移植后第14天外周血白细胞、血小板回升较快，第15天、第20天粒–单系祖细胞（CFU-GM）、红系祖细胞（BFU-E、CFU-E）、造血干细胞（CFU-S）明显高于后者，第20天已达正常。说明原代BMSC不仅可以移植，而且能够加快造血重建，提高移植效果。  
        关键词：骨髓移植;骨髓基质细胞;体外扩增;造血重建   
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      • 阮明,芦春林,杨业鹏,孙菲,洪敏,杜珩,刘景院
        2000, 18(3): 223-225.
        摘要：为研究高温复合电离辐射对小鼠早期的胚胎效应，选用以孕9d LACA小鼠，给予42℃10min 1.0Gy 60Co γ射线处理。于孕后第18天取出胎鼠，观察生长发育情况，测量脑DNA、RNA、蛋白质含量。结果显示，与对照组相比1.0Gy胚鼠组发育迟缓，核酸、蛋白质含量明显下降，而42℃组变化不显著，42℃+1.0Gy照射组损伤程度介于42℃组与1.0Gy组之间。这表明1.0Gy 60Co γ线使胎鼠生长发育受到影响。而预先42℃ 10min处理孕鼠，其胎仔对随后较大剂量电离辐射打击表现出交叉适应性反应。  
        关键词：电离辐射;高温;胚胎;核酸;蛋白质   
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        发布时间：2023-04-07

        快报

      • 马建华,林维真,韩镇辉,姚思德,林念芸
        2000, 18(3): 226-227.
        摘要：文献[1]用激光光解瞬态吸收光谱研究了丙酮三重态与DNA 4种组分相互作用的原初过程，获得了DNA4种碱基及其核苷、核苷酸三重态的全套吸收光谱和动力学参数。同时，首次鉴别了丙酮三重态电子转移氧化嘌呤碱及其衍生物生成其阳离子自由基的机理，进而获取了丙酮三重态电子转移氧化DNA于鸟嘌呤的光谱学和动力学证据，直接证实DNA与丙酮三重态相互作用的主要原初瞬态产物为以鸟嘌呤为端基的阳离子自由基[1]。在此基础上，研究了一种内源性光核酸酶（2-甲基-1, 4-萘醌，即维生素K3）三重态与DNA及其组分相互作用的瞬态吸收光谱及动力学参数，所获取的嘌呤组分阳离子自由基的瞬态吸收光谱与丙酮三重态电子转移氧化嘌呤组分十分相似[2, 3], 而嘧啶组分阳离子自由基的瞬态吸收光谱则与的氧化产物相似[4]。2-甲基-1, 4-萘醌（MQ）三重态电子转移氧化DNA 4种组分生成的共同阴离子自由基则与文献[5]报道及用激光光解或脉冲辐解获取的瞬态吸收光谱相吻合。在此基础上获取的DNA阳离子自由基的瞬态吸收光谱恰好与鸟嘌呤阳离子自由基相似，从而直接检测了MQ电子转移氧化DNA的主要原初瞬态产物为以鸟嘌呤为端基的DNA阳离子自由基（DNA.G+•），并为光核酸酶三重态选择性切割DNA于鸟嘌呤提供了瞬态证据。与此同时，又在解析复合谱的基础上分别获取了DNA及其组分阳离子自由基及MQ阴离子自由基的生成速率常数与MQ三重态的衰减速率常数，它们协同一致地表明MQ三重态的衰减与DNA及其组分的阳离子自由基或MQ阴离子自由基的生成是同步的。从而，为MQ三重态电子转移氧化DNA的三重态机理提供了动力学依据。此外，电子转移氧化脱氧鸟苷酸的速率常数是其中最高的，而氧化胸苷酸的速率常数却是最低的。动力学分析还表明电子转移氧化DNA的速率常数接近于氧化胸苷酸的速率常数，据此推论，当MQ与DNA作用时胸苷酸的电子转移氧化可能是其决速步骤。由于MQ是一种内源性物质，因此，对它的光敏氧化DNA组分的研究已有长久的历史[6]。一种倾向性的结论似乎认为MQ三重态氧化嘧啶组分的速率常数是最高的[6]。本工作的动力学分析准确地判明这一结论是不符合事实的，而且也与4种碱基的氧化电位顺序相抵触，即鸟嘌呤是最易被氧化的，因为它的电离电位是4种碱基中最低的。此外，由于DNA阳离子自由基是电离辐射、紫外光单光子或多光子电离DNA的共同原初瞬态产物，故此可以认为MQ三重态氧化DNA所产生的DNA阳离子自由基也模拟了电离辐射或紫外光电离DNA的原初瞬态产物。  
        关键词：DNA;核苷酸;2-甲基-1, 4-萘醌三重态;自由基离子对;瞬态吸收光谱;电子转移氧化   
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        发布时间：2023-04-07

        研究简报

      • 谷庆阳,高亚兵,王德文,杨志祥,赵坡,杨文峰
        2000, 18(3): 228-231.
        摘要：为研究大鼠放射性皮肤溃疡组织中c-Fos、Rb表达。采用140只Wistar大鼠进行局部照射（γ射线）制备放射性皮肤溃疡动物模型，观察病变1年，然后采用c-Fos、Rb多克隆抗体及免疫组化方法检测皮肤溃疡组织中c-Fos、Rb的表达情况。结果表明；c-Fos、Rb的表达阳性率分别为45.8%（33/72）、63.9%（46/72）, 两者阳性部位主要见于增生肥大的鱗状上皮细胞胞核、增生的间质成纤维细胞胞质及胞核、小血管内皮细胞中。初步的结论是：c-Fos、Rb蛋白的高表达可能与放射性皮肤溃疡难愈合有关。  
        关键词：大鼠;放射性皮肤溃疡;癌基因   
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      • 罗灿,付士波,鞠桂芝
        2000, 18(3): 232-235.
        摘要：采用放射性配体结合法，观察了不同低剂量X射线全身照射对小鼠脾细胞糖皮质激素受体（GCR）表达的影响及75mGy全身照射后GCR表达的时程变化。结果显示，25、50、75mGy X射线全身照射后8h小鼠脾细胞GCR表达明显下降；75mGy X射线全身照射后4h GCR表达开始下降，8hGCR表达显著低于对照组。低剂量X射线全身照射可降低小鼠脾细胞GCR的表达，提示GCR表达下调可能在低剂量辐射免疫增强效应中发挥作用。  
        关键词：糖皮质激素受体;脾细胞;X射线;低剂量辐射   
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        发布时间：2023-04-07
      • 孙义敏,刘树铮
        2000, 18(3): 236-239.
        摘要：用L929细胞染料摄入法检测了小鼠受不同剂量（75mGy, 2.0Gy）X射线全身照射后小鼠腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子α（TNFα）表达量的时程变化及全身照射后24h的剂量–效应关系。结果可见，75mGy照射后3h, TNFα表达量有所增加，从6～120h，均显著高于对照组，12h表达量最高；2.0Gy照射后3～120h，不同时间点均显著高于对照，表达量最高点为12h。从剂量–效应关系中可见，经50mGy～2.0Gy不同剂量照射后，TNFα表达量均显著高于对照组，0.5Gy照射组其表达量最高，而经4.0Gy和6.0Gy照射后，TNFα的表达量显著低于对照组。提示一定剂量电离辐射可诱导巨噬细胞产生TNFα。  
        关键词：X线辐射;腹腔巨噬细胞;肿瘤坏死因子α   
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